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MedWire Noticias: Los investigadores han identificado el objetivo principal de los autoanticuerpos que se encuentran en el suero de pacientes con el trastorno de la piel con ampollas, pénfigo vulgar (PV).

Los pacientes PV desarrollan anticuerpos contra las proteínas desmoglein (DSG) 1 y 3, que ayudan a las células epidérmicas a permanecer juntas y mantener la integridad de la piel, causando ampollas dolorosas en la piel y las membranas mucosas.

Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Roma, Italia) y sus colegas descubrieron que la interfaz cis-adhesiva del dominio extracelular DSG3 (EC) 1 es el objetivo principal del autoanticuerpo fotovoltaico (A) 224 generado en el suero de pacientes con PV.

Las terapias existentes para la afección se dirigen a todo el sistema inmunitario, pero esto puede causar problemas con los efectos secundarios y puede hacer que los pacientes sean vulnerables a las infecciones.

Para identificar el desencadenante de la producción de autoanticuerpos en PV más específicamente, Zambruno y el equipo aislaron anticuerpos de inmunoglobulina (Ig) G 15 específicos para DSG3 de dos pacientes con el trastorno.

De estos, tres capas rotas de células de la piel en el laboratorio y dos fueron patógenas cuando se expresaron en un modelo de transferencia pasiva murino.

Los epítopos reconocidos por los anticuerpos PV patogénicos se aislaron en los subdominios DSG3 EC1 y EC2 y se usó un ensayo serológico específico para identificar el objetivo del PVA224 como la interfaz cis-adhesiva en EC1.

Los investigadores sugieren que la autorreactividad observada en PV se debe a mutaciones somáticas generadas por un antígeno distinto de DSG3, ya que la unión a DSG3 desapareció cuando las mutaciones somáticas revertieron a la secuencia de la línea germinal.

"La identificación de una región inmunodominante dirigida por anticuerpos patógenos tiene implicaciones para el diagnóstico de PV y abre nuevas perspectivas hacia el establecimiento de enfoques terapéuticos para el tratamiento de pacientes PV", escriben Zambruno y su equipo en el Journal of Clinical Investigation.

"Finalmente, la versión germinada de los autoanticuerpos fotovoltaicos puede conducir a la identificación de los antígenos que finalmente conducen al desarrollo de esta enfermedad potencialmente mortal".

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Lea en: http://www.medwire-news.md/66/101414/Dermatology/Therapeutic_targets_for_pemphigus_vulgaris_discovered.html

El pénfigo vulgar (PV) es una enfermedad ampollosa autoinmune de la piel y las membranas mucosas causada por autoanticuerpos contra las proteínas DSG3 y DSG1 de la familia de las desmogleínas (DSG), que conducen a la pérdida de la adhesión de las células queratinocíticas. Para obtener más información sobre los autoanticuerpos FV patógenos, aislamos los anticuerpos 15 IgG específicos para DSG3 de los pacientes 2 PV. Tres anticuerpos alteraron las monocapas de queratinocitos in vitro, y 2 fueron patógenos en un modelo de transferencia pasiva en ratones neonatales. Los epítopos reconocidos por los anticuerpos patógenos se mapearon en los subdominios extracelulares 3 (EC1) y EC1 de DSG2, regiones implicadas en las interacciones cis-adhesivo. Utilizando un ensayo serológico específico del sitio, encontramos que la interfaz cis-adhesivo en EC1 reconocida por el anticuerpo patógeno PVA224 es el objetivo principal de los autoanticuerpos presentes en el suero de pacientes con PV. Los autoanticuerpos aislados utilizaron diferentes genes de la región variable de la cadena pesada y ligera y llevaron a altos niveles de mutaciones somáticas en regiones determinantes de la complementariedad, consistentes con la selección antigénica. Sorprendentemente, la unión a DSG3 se perdió cuando las mutaciones somáticas se revertieron a la secuencia de la línea germinal. Estos hallazgos identifican la interfaz cis-adhesivo de DSG3 como la región inmunodominante dirigida por anticuerpos patógenos en PV e indican que la autorreactividad se basa en mutaciones somáticas generadas en la respuesta a un antígeno no relacionado con DSG3.

El pénfigo vulgar (PV) es una enfermedad autoinmune ampollosa que pone en peligro la vida de la piel y las membranas mucosas causada por autoanticuerpos que se unen a las moléculas de adhesión célula-célula tipo cadherina desmoglein 3 (DSG3) y DSG1, los principales constituyentes de los desmosomas, y causan pérdida de adhesión de células de queratinocitos. El papel crítico de los autoanticuerpos en la patogénesis PV se basa en las observaciones de que la actividad de la enfermedad se correlaciona con títulos de anticuerpos anti-DSG3, que los recién nacidos de madres con PV activo presentan ampollas causadas por la transferencia placentaria de anticuerpos maternos y que las lesiones similares a pénfigo inducido en ratones neonatales por transferencia pasiva de IgG anti-DSG3 de pacientes PV.

En la piel, DSG3 se expresa principalmente en las capas basal y suprabasal, mientras que DSG1 se expresa predominantemente en las capas epidérmicas superiores. Por el contrario, en epitelios estratificados no cornificados, como la mucosa oral, DSG3 se expresa altamente en todo el epitelio, mientras que DSG1 se expresa en un nivel mucho más bajo. El patrón de expresión diferencial de DSG1 y DSG3 es responsable de las variantes clínicas del pénfigo: los anticuerpos contra DSG3 están presentes en la forma de la mucosa, mientras que los anticuerpos contra DSG3 y DSG1 están asociados con lesiones mucocutáneas.

DSG3 es una glicoproteína de membrana de unión a calcio con un dominio extracelular que comprende subdominios distintos de 5 (EC1-EC5), y se sintetiza como proproteína, que se procesa en el aparato de Golgi mediante la eliminación de un propéptido antes de transportarlo a la superficie celular. La escisión del propéptido se produce aguas arriba de un residuo de triptófano conservado en el subdominio EC1, desenmascarando residuos críticos para la formación de interacciones homófilas con DSG3 en células opuestas. Varios estudios han demostrado que los anticuerpos policlonales en suero PV reaccionan principalmente con el aminoterminus de DSG3 en los subdominios EC1 y EC2 (aminoácidos 1-161).

El aislamiento de mAbs patógenos es fundamental para abordar las preguntas sobre el mecanismo que induce la respuesta autorreactiva y conduce a la formación de ampollas en pacientes con PV. Amagai y compañeros de trabajo aislaron de un modelo de ratón activo de PV un anticuerpo patógeno, AK23, que causa pérdida de adhesión celular uniéndose al subdominio EC1 de DSG3 que está involucrado en la formación de la interfaz trans-adhesiva. Se aislaron varios mAb humanos anti-DSG patógenos y no patógenos como fragmentos de región variable monocatenarios (scFvs) de un paciente PV. De forma similar al mAb AK23, la actividad patogénica de estos anticuerpos humanos se mapeó en la región aminoterminal de EC1, que está enmascarado por el propéptido. Tomados en conjunto, los datos de humanos y ratones sugieren que los anticuerpos patógenos se unen principalmente a EC1 e interrumpen la adhesión de los queratinocitos al interferir con la interfaz trans-adhesiva de DSG3.

En este estudio, aislamos de pacientes 2 PV varios autoanticuerpos IgG que se unen a DSG3. Estos anticuerpos llevaban altos niveles de mutaciones somáticas que se requerían para unirse a DSG3. Los epítopos reconocidos por los anticuerpos patógenos 3 se mapearon en los subdominios EC1 y EC2 en regiones que se espera que participen en las interacciones cis-adhesivo. Se descubrió que esta región era el objetivo principal de los autoanticuerpos séricos en pacientes con PV. Estos resultados identifican la interfaz cis-adhesivo como la región inmunodominante dirigida por anticuerpos patógenos en PV y sugieren que la autorreactividad se basa en mutaciones somáticas desencadenadas por un antígeno no relacionado.

Artículo completo Disponible en: http://www.jci.org/articles/view/64413